[发明专利]HDAC2基因敲除的BHK-21细胞系及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 202110154125.X | 申请日： | 2021-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN112877275B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 孙跃峰;龚青;侯石桐;殷相平;王相伟;毛箬青 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N15/55;C12N15/85;C12Q1/02;C12N7/00 |
| 代理公司： | 北京兴智翔达知识产权代理有限公司 11768 | 代理人： | 郭卫芹 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了HDAC2基因敲除的BHK‑21细胞系的构建方法，利用CRISPR/Cas9技术对口蹄疫疫苗生产用细胞系BHK‑21中的HDAC2进行基因敲除；发明人将用于敲除HDAC2的CRISPR质粒转染BHK‑21细胞后，利用抗生素筛选结合梯度稀释，用克隆环法分离到了多个细胞克隆；提取基因组DNA后进行PCR扩增、测序，成功鉴定到了1个HDAC2基因发生纯合移码突变的细胞克隆；其中HDAC2‑KO‑B3在Cas9预定切割位置处有1个碱基的缺失。HDAC2敲除的BHK‑21细胞系中口蹄病毒复制速率明显加快，最终病毒滴度有显著提高，且HDAC2敲除后对细胞生长速率无显著影响，说明其有用于口蹄疫疫苗生产的前景。为进一步在悬浮培养型BHK‑21细胞中敲除HDAC2，直接用于口蹄疫疫苗生产奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | hdac2 基因 bhk 21 细胞系 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
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