[发明专利]一种变形假单胞菌HtpG抗原及其多克隆抗体的制备方法在审
| 申请号： | 202110175482.4 | 申请日： | 2021-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN112831515A | 公开（公告）日： | 2021-05-25 |
| 发明（设计）人： | 章幼玉;黄力行;王佳佳;何荣超;鄢庆枇 | 申请（专利权）人： | 厦门大学;集美大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/31;C07K16/12;C07K16/06 |
| 代理公司： | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人： | 刘康平 |
| 地址： | 361005 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种变形假单胞菌H tpG抗原及其多克隆抗体的制备方法；包括以下步骤：首先，按照大肠杆菌的密码子偏好，人工合成H tpG基因插入pET‑32表达载体，挑选阳性克隆测序验证；然后，构建好的质粒转化BL21DE3感受态细胞，培养、诱导、裂解、离心，得到蛋白质，SDS‑PAGE检测蛋白表达情况；进一步，选择小样表达良好的菌株进行接种、培养、诱导、裂解、纯化，得到蛋白，SDS‑PAGE鉴定蛋白分子量、纯度及浓度；进一步，以所得H tpG蛋白质为抗原进行动物免疫，收集抗血清并进行纯化，即得H tpG抗体。获得了变形假单胞菌的HtpG抗原并制备得到相应的HtpG多克隆抗体。经间接ELISA法检测抗血清及亲和纯化抗体效价，结果显示亲和纯化抗体得率正常。本发明方法简单，制备的抗体免疫原性强。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 变形 假单胞菌 htpg 抗原 及其 克隆 抗体 制备 方法 | ||
【主权项】：
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