[发明专利]一种基于ELP-Intein和ccdB的高效质粒载体及其使用方法在审
| 申请号： | 202110185156.1 | 申请日： | 2021-02-10 |
| 公开（公告）号： | CN112852856A | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 安迎锋;高何瑞;高嵩;王虹玲;张艺峰;许淑敏;邵一伦;杨尧;王潘;汤静怡;李少荣 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/65;C07K1/14;C07K1/22 |
| 代理公司： | 北京化育知识产权代理有限公司 11833 | 代理人： | 尹均利 |
| 地址： | 110161 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程领域，具体的说是一种基于ELP‑Intein和ccdB的高效质粒载体及其使用方法。质粒载体为闭合环状的双链DNA，含有ccdB基因做作为负筛选标记，因此该载体能够灵活地进行无背景克隆。同时，该质粒载体含有T7启动子和终止子，并具有ELP‑Intein表达盒，可以高效地表达外源蛋白，还可用基于Intein自我切割的ELP标签和His‑tag标签双纯化法进行蛋白纯化。同时，将基于尿素的变性‑复性循环与基于ELP标签的纯化步骤相结合，可以有效的实现不溶性蛋白的纯化。本质粒载体的灵活克隆功能、高效表达功能、双纯化功能，特别是对于不溶性蛋白包涵体的纯化功能，将使得该载体及相应使用方法在基因工程领域具有广泛的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 elp intein ccdb 高效 质粒 载体 及其 使用方法 | ||
【主权项】：
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