[发明专利]一种降低Taqman探针荧光背景的方法在审
申请号: | 202110226181.X | 申请日: | 2021-03-01 |
公开(公告)号: | CN112979737A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 雍金贵;刘宗文;刘倩 | 申请(专利权)人: | 通用生物系统(安徽)有限公司 |
主分类号: | C07H21/02 | 分类号: | C07H21/02;C07H1/00;C12Q1/6806 |
代理公司: | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人: | 刘生昕 |
地址: | 239000 安徽省滁*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种降低Taqman探针荧光背景的方法,采用固相亚磷酰胺三酯法在全自动DNA合成仪上合成Taqman探针时3端淬灭基团CPG先加盖再脱保护、耦连、加帽、氧化四步循环反应,再将合成板依次用DEA‑ACN混合液和ACN进行处理后,进行氨解,氨解结束后,进行脱洗将合成板中样品洗脱至全新96孔板中后,通过HPLC纯化分离得到探针,该方法在传统固相亚磷酰胺三酯法的脱保护、耦连、加帽、氧化四步循环反应中在首次脱保护前增加加帽步骤以阻止未标上淬灭基团的CPG参与后续反应,避免带荧光标记副产物存在,从而降低Taqman探针荧光背景。 | ||
搜索关键词: | 一种 降低 taqman 探针 荧光 背景 方法 | ||
【主权项】:
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