[发明专利]基因多段重复的连接克隆方法在审
| 申请号： | 202110231338.8 | 申请日： | 2021-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN113005119A | 公开（公告）日： | 2021-06-22 |
| 发明（设计）人： | 雍金贵;崔康乐;王维坤;骆晓雯;纪世春 | 申请（专利权）人： | 通用生物系统（安徽）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/70;C12N15/66;C12N15/64 |
| 代理公司： | 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 | 代理人： | 刘生昕 |
| 地址： | 239000 安徽省滁*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基因多段重复的连接克隆方法，包括如下步骤：步骤S1、将引物通过PCR扩增模板得到B片段；步骤S2、用二类酶FaqI和BsaI双酶切第一步的PCR扩增得到的B片段；BsaI单酶切克隆载体V；步骤S3、将步骤S2酶切的PCR产物和载体V等比混合，之后加入T4DNA连接酶连接，制得连接产物；步骤S4、将步骤S3制得的连接产物导入感受态细胞，涂布LB+KanR平板、培养；步骤S5、菌落PCR验证以及提取质粒进行测序验证；使用引物Primer3和Primer4扩增模板，成功扩增出特异性单一条带，并且可用于下一步酶切连接。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 重复 连接 克隆 方法 | ||
【主权项】：
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