[发明专利]一种黄姑鱼肠道上皮细胞的有效分离方法有效
| 申请号： | 202110241355.X | 申请日： | 2021-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN113025559B | 公开（公告）日： | 2023-01-10 |
| 发明（设计）人： | 王立改;汪波;谭朋;徐冬冬;陈睿毅;竺奇慧 | 申请（专利权）人： | 浙江省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N11/14;C12N11/082 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 尉伟敏 |
| 地址： | 316021 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及细胞分离技术领域，针对现有肠壁上皮细胞分离过程中蛋白酶稳定性差的问题，公开了一种黄姑鱼肠道上皮细胞的有效分离方法，包括：将黄姑鱼浸泡在含有青霉素和链霉素的海水中禁食1‑2天；分离肠道并剪开肠壁，并放到PBS溶液中，去除肠道上脂肪和腹膜；将肠壁剪碎得到肠道组织块，再用DMEM/F12培养液清洗并离心，重复离心2‑4次；同时加入肠道组织块和固定化蛋白酶消化液，进行酶解消化；停止消化，处理后加入DMEM/F12培养液待用。引入具有负载能力强的蛋白酶载体，将消解蛋白酶固定在载体上，使得固定化蛋白酶具有较强的耐热性和更宽的pH值范围，保证固定化蛋白酶的性能稳定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 黄姑鱼 肠道 上皮细胞 有效 分离 方法 | ||
【主权项】：
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