[发明专利]一种恶臭假单胞菌烯醇酶基因克隆方法与应用在审
申请号: | 202110275886.0 | 申请日: | 2021-03-15 |
公开(公告)号: | CN112941090A | 公开(公告)日: | 2021-06-11 |
发明(设计)人: | 胡风庆;赵小慧;吴停停 | 申请(专利权)人: | 辽宁大学 |
主分类号: | C12N15/60 | 分类号: | C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/62;C12R1/19 |
代理公司: | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 | 代理人: | 金春华 |
地址: | 110000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开一种恶臭假单胞菌烯醇酶基因克隆方法与应用。本发明针对PHA合酶在粗甘油中耐受力比较弱的问题,从恶臭假单胞菌烯醇酶基因组出发,加入引物PCR成功扩增得到1290bp的片段,通过酶切连接成功构建了载体pET28a‑Eno,经酶切和测序验证正确后转化进入大肠杆菌BL21中获得表达重组菌。对重组菌诱导表达的两个条件IPTG浓度和温度进行优化,成功使Eno包涵体表达大量可溶表达。这对于利用价格低廉的生物柴油副产物甘油合成PHA,解决生物柴油副产物过度积累带来的环境问题,降低PHA的生产成本具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 恶臭 假单胞菌烯醇酶 基因 克隆 方法 应用 | ||
【主权项】:
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