[发明专利]海月水母水螅体的单细胞分离方法有效

专利信息
申请号: 202110276157.7 申请日: 2021-03-15
公开(公告)号: CN113122492B 公开(公告)日: 2022-12-02
发明(设计)人: 肖良;李晓亚;孙学军;陈新彤;梁洪昱;高翔;刘青;王静;姜贵先;刘文文 申请(专利权)人: 中国人民解放军海军军医大学
主分类号: C12N5/07 分类号: C12N5/07
代理公司: 上海申浩律师事务所 31280 代理人: 赵青
地址: 200433 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明提供了海月水母水螅体的单细胞分离方法,包括A、人工海水制备;B、水螅体样品准备:将水螅体转移至洁净无菌人工海水的培养容器内,置于20℃的培养箱中;使用前饥饿24h,选取触手伸展的水螅体待用并将样品切成小碎块;C、单细胞制备:配制30g/L氯化钠溶液,而后以其作为溶剂配置解离酶液1或2;将样品小块加入至解离酶液消化,得消化混合液;混合液经细胞筛过滤,滤液经4℃离心后,沉淀采用解离液重复清洗后,复溶于解离液中得到单细胞悬液。解离酶液1包括0.01~1.5g/L胶原酶Ι、0.01~1g/L中性蛋白酶、0.01~0.5g/L弹性蛋白酶;解离酶液2包括0.01~2g/L胶原酶IV以及0.01~20U/mL木瓜蛋白酶。
搜索关键词: 水母 水螅 单细胞 分离 方法
【主权项】:
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