[发明专利]一种生产杂合型N糖链修饰糖蛋白细胞株DFKO及其制备方法有效
| 申请号： | 202110286330.1 | 申请日： | 2021-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN113215103B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 藤田盛久;冷继雄;高晓冬;杨刚龙;柳艺石;任伟伟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/12;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 刘峰 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种生产杂合型N糖链修饰糖蛋白细胞株DFKO及其制备方法，其制备方法包括，将靶序列连接到CRISPR‑Cas9敲除系统的PX330‑EGFP质粒中，转染于HEK293野生型细胞中，转染后利用流式分选仪进行筛选富集和有限稀释，得到DFKO单克隆细胞。本发明在哺乳动物细胞HEK293中，利用CRISPR‑Cas9技术敲除N糖基化路径的MAN2A1、MAN2A2和FUT8基因，建立了三基因敲除细胞DFKO，该细胞可生产以杂合型且不含核心岩藻糖修饰为主要N糖链。该细胞株可应用于生产生物医药糖蛋白，能大大提高其稳定性和生物活性；特别地，由于DFKO细胞株丧失了核心岩藻糖修饰，利用该细胞株生产抗体，可以大大提高该抗体的ADCC效力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生产 杂合型 修饰 糖蛋白 细胞株 dfko 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
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