[发明专利]猪带绦虫Ts14-3-3.3 DNA疫苗制备及鉴定方法有效
申请号: | 202110322956.3 | 申请日: | 2021-03-25 |
公开(公告)号: | CN112891523B | 公开(公告)日: | 2023-07-04 |
发明(设计)人: | 周必英;张悦;欧阳任辉 | 申请(专利权)人: | 遵义医科大学 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61P33/12;C12N15/85;C12N15/12 |
代理公司: | 遵义市创先知识产权代理事务所(普通合伙) 52118 | 代理人: | 刘创先 |
地址: | 563000 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪带绦虫Ts14‑3‑3.3 DNA疫苗制备及鉴定方法,属于基因工程疫苗技术领域,包含以下步骤:1)采用PAS法,全基因合成Ts14‑3‑3.3和sp‑Ts14‑3‑3.3;2)将目的基因克隆至真核表达载体,转入克隆菌株,挑取阳性克隆子测序鉴定和双酶切鉴定重组质粒;3)随后制备两种转染级别质粒,并分别转染人293F胚肾细胞,采用Western blot法鉴定;4)然后将小鼠分成4组;5)于首次免疫后0w、2w、4w、6w、8w收集小鼠血清和脾淋巴细胞进行鉴定。本发明成功制备了猪带绦虫pMZ‑X3‑Ts14‑3‑3.3和pMZ‑X3‑sp‑Ts14‑3‑3.3两种DNA疫苗。实现了猪带绦虫Ts14‑3‑3.3蛋白在人293F胚肾细胞中的表达。猪带绦虫pMZ‑X3‑Ts14‑3‑3.3和pMZ‑X3‑sp‑Ts14‑3‑3.3两种DNA疫苗均可诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答。 | ||
搜索关键词: | 绦虫 ts14 3.3 dna 疫苗 制备 鉴定 方法 | ||
【主权项】:
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