[发明专利]猪带绦虫Ts14-3-3.3 DNA疫苗制备及鉴定方法有效

专利信息
申请号: 202110322956.3 申请日: 2021-03-25
公开(公告)号: CN112891523B 公开(公告)日: 2023-07-04
发明(设计)人: 周必英;张悦;欧阳任辉 申请(专利权)人: 遵义医科大学
主分类号: A61K39/00 分类号: A61K39/00;A61P33/12;C12N15/85;C12N15/12
代理公司: 遵义市创先知识产权代理事务所(普通合伙) 52118 代理人: 刘创先
地址: 563000 贵*** 国省代码: 贵州;52
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摘要: 发明公开了一种猪带绦虫Ts14‑3‑3.3 DNA疫苗制备及鉴定方法,属于基因工程疫苗技术领域,包含以下步骤:1)采用PAS法,全基因合成Ts14‑3‑3.3和sp‑Ts14‑3‑3.3;2)将目的基因克隆至真核表达载体,转入克隆菌株,挑取阳性克隆子测序鉴定和双酶切鉴定重组质粒;3)随后制备两种转染级别质粒,并分别转染人293F胚肾细胞,采用Western blot法鉴定;4)然后将小鼠分成4组;5)于首次免疫后0w、2w、4w、6w、8w收集小鼠血清和脾淋巴细胞进行鉴定。本发明成功制备了猪带绦虫pMZ‑X3‑Ts14‑3‑3.3和pMZ‑X3‑sp‑Ts14‑3‑3.3两种DNA疫苗。实现了猪带绦虫Ts14‑3‑3.3蛋白在人293F胚肾细胞中的表达。猪带绦虫pMZ‑X3‑Ts14‑3‑3.3和pMZ‑X3‑sp‑Ts14‑3‑3.3两种DNA疫苗均可诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答。
搜索关键词: 绦虫 ts14 3.3 dna 疫苗 制备 鉴定 方法
【主权项】:
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