[发明专利]一种纳豆芽孢杆菌感受态细胞的制备方法及遗传转化方法

摘要

一种纳豆芽孢杆菌感受态细胞的制备方法及遗传转化方法，包括将冷冻保藏的纳豆芽孢杆菌在LB固体培养基上划线，37℃条件下培养16‑20h，在划线平板上挑一个单菌落，接种于盛有LB液体培养基的三角瓶中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h；取培养液，接种于BN‑Ⅰ培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养12‑16h；取菌液接种于BN‑Ⅰ培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养4‑5h；取菌液接种于BN‑II培养基中，37℃条件下以180‑250rpm摇床培养1‑2h；向菌液中加入促转化液，37℃条件下以80‑120rpm摇床培养10‑30min；培养结束后得到含有感受态细胞的菌液。本发明制备的纳豆芽孢杆菌感受态细胞，其转化率得到大幅提升，后续将为该菌的基因表达、沉默、敲除及功能研究提供基础。