[发明专利]RNA快速建库方法及其应用

摘要

本发明提供一种RNA快速建库方法(Easy‑seq)，其步骤包括：提取样本中的total RNA，采用逆转录阻碍探针法去除rRNA，同时逆转录获得一端带有P7序列的cDNA；对多余的随机引物进行消解处理；对cDNA进行多聚腺苷酸化，在cDNA的3’端加上polyA，采用带有3’突出末端的双链DNA接头，在cDNA的另一端接上P5序列；文库扩增及回收。Easy‑seq具有耗时短、操作简单和损失小等优点，因此可以应用于单细胞转录组测序(scEasy‑seq)。相较于已有的scRNA‑seq技术，scEasy‑seq具有基因检出率高、RNA信息完整和建库产量高等优点，是一种高效灵敏的单细胞转录组测序技术，可以广泛应用于科学研究和疾病诊断等领域。