[发明专利]一种用于基因编辑NK细胞的mRNA模板及构建方法、mRNA的体外转录方法和应用在审

专利信息
申请号: 202110715607.8 申请日: 2021-06-28
公开(公告)号: CN113444744A 公开(公告)日: 2021-09-28
发明(设计)人: 焦顺昌;张嵘;宋文静;袁翰 申请(专利权)人: 北京鼎成肽源生物技术有限公司
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10;C12N5/0783;C07K14/725;C07K14/54
代理公司: 北京高沃律师事务所 11569 代理人: 苏士莹
地址: 102200 北京市昌平区双*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供了一种用于基因编辑NK细胞的mRNA模板及构建方法、mRNA的体外转录方法和应用,涉及生物医药技术领域。本发明在mRNA的模板上采用一种线性化质粒,省略线性化步骤;在模板中预先加入PolyA121结构,舍去额外的加尾工作;采用ARCA抗反帽的帽子类似物,在体外转录过程中同时完成加帽。总之,本发明通过特殊的反应体系和特殊线性化质粒模板,将mRNA的体外转录简化为一步。本发明减少了mRNA的降解,大大降低了对NK细胞的刺激性和毒性;帽子类似物大大提高了mRNA的稳定性,降低了NK细胞炎性反应。本发明利用制备得到的mRNA在NK细胞上可成功过表达细胞因子或人工抗原嵌合受体。
搜索关键词: 一种 用于 基因 编辑 nk 细胞 mrna 模板 构建 方法 体外 转录 应用
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