[发明专利]一种定向合成右旋糖酐的融合酶及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一种可以定向合成低分子量右旋糖酐的融合酶大肠杆菌工程菌的构建方法以及其应用，以P473S/P856S双突变的热稳定型右旋糖酐蔗糖酶基因和链球菌来源的右旋糖酐酶基因为模板，以(EAAAK)n(n＝0,1,2)为连接肽将两个酶基因按催化顺序进行同源重组并转化到BL21(DE3)大肠杆菌中，获得的可以定向合成不同低分子量右旋糖酐的融合酶大肠杆菌BL21(DE3)/dex‑YG‑nG‑a1dex(n＝0,1,2)基因工程菌。本发明构建的dex‑YG‑nG‑a1dex(n＝0,1,2)基因工程菌合成的右旋糖酐分子量集中，本发明构建的dex‑YG‑nG‑a1dex(n＝0,1,2)基因工程菌能通过控制条件与连接肽将大部分蔗糖直接转化为不同低分子量的右旋糖酐，其中可以直接获得右旋糖酐的重均分子量为1000‑2000Da，5000Da，10000Da。