[发明专利]一种同时表达PLAUR和GPLD1基因的质粒载体及其构建方法有效
申请号: | 202111227062.2 | 申请日: | 2021-10-21 |
公开(公告)号: | CN113755527B | 公开(公告)日: | 2022-04-26 |
发明(设计)人: | 林彬;林泽斌;许恒;王萍;周丽诗 | 申请(专利权)人: | 广东源心再生医学有限公司 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/12;C12N15/55;C12N15/65;C12N15/66 |
代理公司: | 佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙) 44387 | 代理人: | 颜春艳 |
地址: | 528000 广东省佛山市南海区狮山镇321国*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种同时表达PLAUR和GPLD1基因的质粒载体及其制备方法。质粒载体构建过程中,先设计一段含有NheⅠ‑AgeⅠ‑SbfⅠ‑EcorⅠ‑NsiⅠ‑MluⅠ‑AvrⅡ‑BamhⅠ酶切位点的DNA,对NheⅠ和BamhⅠ双酶切后回收片段,通过相同的酶切位点将回收片段克隆到双酶切后的pCW‑Cas9‑Blast载体得到新克隆载体pCW‑DNA‑Blast。扩增得到带上述酶切位点的PLAUR和GPLD1基因片段并与pCW‑DNA‑Blast经相同的酶切处理后连接即得。本发明首次通过质粒载体使PLAUR基因与GPLD1基因同时表达,从而在细胞培养上清中获得大量PLUAR蛋白。 | ||
搜索关键词: | 一种 同时 表达 plaur gpld1 基因 质粒 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
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