[发明专利]大肠杆菌膜蛋白ZraS突变体、编码所述突变体的基因、重组载体及制备方法与应用在审

专利信息
申请号: 202111230759.5 申请日: 2021-10-22
公开(公告)号: CN114133436A 公开(公告)日: 2022-03-04
发明(设计)人: 刘复荣;张润钊;崔金明;李小明 申请(专利权)人: 广州先进技术研究所
主分类号: C07K14/245 分类号: C07K14/245;C12N15/31;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/10;C12R1/19
代理公司: 广州容大知识产权代理事务所(普通合伙) 44326 代理人: 刘新年
地址: 511458 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明提供大肠杆菌双组分调控系统膜蛋白ZraS突变体、编码所述突变体的基因、重组载体及制备方法与应用。所述突变体包括S154T、A214S、Q313R、T415A中的一种或几种。这些突变体的制备方法包括:构建SP‑ZraS噬菌体;采用噬菌体辅助连续定向进化方法(PACE)通过正筛与负筛交替进化SP‑ZraS噬菌体对铅离子的底物特异性,获得进化样品;对进化样品进行氨基酸测序分析,获得突变位点信息;根据突变位点信息构建所述膜蛋白ZraS突变体的表达载体,记作pZraS,并表达获得所述膜蛋白ZraS突变体。该突变体对金属铅离子的响应灵敏度较比野生型系统具有显著提升,对铅的调控范围增大,检测限低至1μM;同时当离子浓度范围在0~10μM时,可实现对重金属铅离子的特异、灵敏检测。
搜索关键词: 大肠杆菌 膜蛋白 zras 突变体 编码 基因 重组 载体 制备 方法 应用
【主权项】:
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