[发明专利]一种黄色黏球菌大片段敲除质粒及其敲除方法在审

专利信息
申请号: 202111289676.3 申请日: 2021-11-02
公开(公告)号: CN114032248A 公开(公告)日: 2022-02-11
发明(设计)人: 董义杰;朱红惠;董红红;冯广达;姚青 申请(专利权)人: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
主分类号: C12N15/74 分类号: C12N15/74;C12N1/21;C12N15/65;C12N15/31;C12R1/01
代理公司: 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 代理人: 刘明星;朱聪聪
地址: 510070 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种黄色黏球菌大片段敲除质粒及其敲除方法。将pilA基因的启动子片段PpilA和sacB基因的ORF片段融合获得PpilA‑SacB的模块,扩增出四环素抗性基因,获得Ptet‑TCR模块,将PpilA‑SacB模块和Ptet‑TCR模块构建到pBJ113载体的BamHI和XbaI位点,获得质粒pBJ116。本发明的质粒pBJ116,其含有卡那霉素正向筛选标记、半乳糖负向筛选标记、四环素正向筛选和蔗糖负向筛选模块,通过两次正负筛选系统,实现黄色黏球菌基因组上大片段的敲除。经试验发现,本发明的方法获得的Myxochelin A编码基因ΔMXAN_3618突变体产生铁载体的水平显著降低,并且捕食铜绿假单胞菌的能力显著降低。并且该方法所需的时间较短。
搜索关键词: 一种 黄色 球菌 片段 质粒 及其 方法
【主权项】:
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