[发明专利]大肠杆菌-芽孢杆菌穿梭质粒载体及其构建方法和应用在审
申请号: | 202111297649.0 | 申请日: | 2021-11-04 |
公开(公告)号: | CN113980991A | 公开(公告)日: | 2022-01-28 |
发明(设计)人: | 罗楚平;张双玉;李彬;王小花;朱桃;陈悦雯;仲海静;张路阳;刘媛;田宝霞;张金峰 | 申请(专利权)人: | 淮阴工学院;江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N15/75 | 分类号: | C12N15/75;C12N15/65;C12N15/64;C12R1/125 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 孙斌 |
地址: | 223005 江苏省淮安市洪泽区东七街三号高*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了大肠杆菌‑芽孢杆菌穿梭质粒载体及其构建方法和应用,该穿梭质粒载体包括pTC、pBE、pTN和pTK中的任意一种,序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示。本发明从PUC19出发获得大肠杆菌复制起点和氨苄青霉素抗性的基因片段,从pMarA出发获得芽孢杆菌温敏复制起点和卡那霉素抗性和红霉素抗性的基因片段,从pBEST502和pSG1164中分别获得新霉素抗性基因和氯霉素抗性基因,经过酶切和酶链接构建了大肠杆菌芽孢杆菌穿梭质粒载体。本发明中的四个质粒载体可在不同芽孢杆菌中穿梭、共存以及消除,避免质粒发生漂移对环境产生污染,可潜在应用于外源蛋白的表达,实现对芽孢杆菌基因组DNA的编辑。 | ||
搜索关键词: | 大肠杆菌 芽孢 杆菌 穿梭 质粒 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
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