[发明专利]重组T4连接酶突变体、编码DNA及NGS建库方法有效
| 申请号： | 202111336097.X | 申请日： | 2021-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN113774032B | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 宋东亮;陈晶晶;江翱;孙睿;侯策;王嫚;刘倩;曹振 | 申请（专利权）人： | 翌圣生物科技（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00;C12N15/52;C12Q1/6806;C40B50/06 |
| 代理公司： | 苏州根号专利代理事务所(普通合伙) 32276 | 代理人： | 朱华庆 |
| 地址： | 200120 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明在野生型T4DL的基础上，进行了Q19K、L63T、E88R、P127K、K159S、K225A、F233A、A237R、D371W、E440K、T451K、D452P多个点突变；在突变体的两端包含两个双链DNA结合域；双链DNA结合域与T4DL之间的连接使用多肽桥。最终获得了一系列低偏好性和高效率的重组DNA连接酶突变体T4DLm。并公开了其编码DNA和NGS建库方法。T4DLm在平末端连接上具有显著的优势，连接效率高达95%，且偏好性极低。利用T4DLm开发了高效简便的新型NGS建库技术，具有耗时短、文库产量更高、均一性更好、文库自连更低、捕获测序数据覆盖深度更好等明显的优势，非常适用于临床样本的NGS检测，尤其是肿瘤样本的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 t4 连接酶 突变体 编码 dna ngs 方法 | ||
【主权项】：
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