[发明专利]一种基于膜体系-酵母双杂交发现膜蛋白的方法在审
申请号: | 202111349955.4 | 申请日: | 2021-11-15 |
公开(公告)号: | CN114214357A | 公开(公告)日: | 2022-03-22 |
发明(设计)人: | 朱也 | 申请(专利权)人: | 南京瑞源生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C12Q1/6869;C12Q1/04;G01N33/68;C12R1/865 |
代理公司: | 北京化育知识产权代理有限公司 11833 | 代理人: | 尹均利 |
地址: | 210000 江苏省南京市栖*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及膜蛋白实验技术领域,且公开了一种基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法,一种基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法,包括以下材料诱饵克隆:pBT3‑STE‑A、诱饵载体:pBT3‑STE、文库酵母质粒:草膜文库、Clontech酵母双杂交系统、培养基、贮备液。该基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法,通过将诱饵质粒转化受体菌NMY51中及其自激活检测、文库筛选、筛库结果、酵母阳性克隆鉴定及测序比对与测序比对结果、酵母阳性克隆鉴定及测序比对与测序比对结果、酵母阳性克隆回转验证等步骤,通过酵母阳性克隆回转验证将筛选得到的34个酵母阳性克隆,均能在SD‑TL、SD‑TLH+30mM 3AT、SD‑TLHA+30mM 3AT缺陷性平板上生长,从而得到最终的膜蛋白,解决了与pBT3‑STE‑A作用的蛋白不易发现的问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 体系 酵母 双杂交 发现 膜蛋白 方法 | ||
【主权项】:
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