[发明专利]一种地龙中纤溶活性多肽及其制备方法

摘要

本发明公开了一种地龙中纤溶活性多肽及其制备方法，该方法包括如下步骤：步骤一，取地龙鲜品冻干粉，加入NH4HCO3溶液超声辅助提取，3K滤膜超滤，收集分子量大于3K的组分得到地龙蛋白；步骤二，地龙蛋白中加入碱性蛋白酶，酶解产物通过10K滤膜超滤，收集小于10K的组分得到酶解多肽；步骤三，将酶解多肽溶解于Tris‑HCl中，然后加载到HiPrep16/10DEAE FF预装柱，梯度洗脱，收集每个馏分，冷冻干燥后测定抗凝活性；步骤四，取抗凝活性最高的馏分加载到凝胶Sephadex G‑10色谱柱，超纯水洗脱，取第一组馏分即得所述纤溶活性多肽。本发明制备得到的HEPLPEP、EYPLPEP，为首次从地龙蛋白中酶解纯化分离得到，富含脯氨酸，不含赖氨酸、精氨酸，不易在肠胃道被胰蛋白酶等水解酶水解，具有良好的溶栓活性。