[发明专利]一种经半理性改造提升活性的腈水解酶突变体在审
| 申请号： | 202111476802.6 | 申请日： | 2021-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN114214308A | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;韩来闯;刘欣悦;崔文璟;程中一;刘中美;周丽;郭军玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/78 | 分类号： | C12N9/78;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/12;C12P7/40;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种经半理性改造提升活性的腈水解酶突变体，属于酶工程领域。本发明为了提高腈水解酶PCC6803酶活，通过底物对接确定了催化口袋附近与催化活性相关的位点，利用CAST建库NNK突变，通过已构建的烟酸传感器作为初筛工具，利用荧光强度作为筛选依据，将获得的有效果(荧光强度低的)的两个库的位点进行组合突变，再利用传感器进行筛选，然后将荧光强度低的突变体重新构建至表达载体及宿主中表达及纯化，利用HPLC测定纯酶比酶活，最终获得比酶活比野生酶WT提高了57％、180％、555％的突变体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 理性 改造 提升 活性 水解 突变体 | ||
【主权项】：
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