[发明专利]一种从头合成核黄素的大肠杆菌工程菌的构建方法在审
申请号: | 202111482186.5 | 申请日: | 2021-12-07 |
公开(公告)号: | CN114134094A | 公开(公告)日: | 2022-03-04 |
发明(设计)人: | 姚泉洪;彭日荷;邓永东;田永生;张文慧;许晶;王波;高建杰;韩红娟;王丽娟;王宇 | 申请(专利权)人: | 上海市农业科学院 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/52;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/55;C12N15/56;C12N15/60;C12N15/61;C12N15/65;C12P25/00;C12R1/19 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 靳魁 |
地址: | 201107 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种从头合成核黄素的大肠杆菌工程菌的构建方法,涉及基因工程领域,所述方法包括:对来自枯草芽孢杆菌的26个合成核黄素的基因进行结构优化,并化学合成,获得了优化后的26个基因;选择T7启动子和终止子控制所述优化后的26个基因的表达,完成优化后的26个基因原核表达单元的拼接;构建了两个不同复制起点和抗性标记的质粒pBR326和pYB8895,在两个相容质粒基础上组装了核黄素从头生物合成途径4大功能模块;将带有4大功能模块的双质粒转入带有T7RNAP基因的大肠杆菌,获得了从头合成核黄素的含枯草杆菌26个基因原核表达单元的大肠杆菌工程菌株。通过摇瓶发酵实验来检验其生成核黄素的能力,最终通过HPLC质谱法测得其核黄素产量达到0.55g/L。 | ||
搜索关键词: | 一种 从头 合成 核黄素 大肠杆菌 工程 构建 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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