[发明专利]一种自主构建的SLA-2-HB01-pCDH/sT2细胞系筛选CTL表位方法

摘要

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种自主构建的SLA‑2‑HB01‑pCDH/sT2细胞系筛选CTL表位方法。本发明将外源的SLA‑2‑HB01基因转染到sT2细胞，建立了稳定SLA‑2基因表达模型。经过细胞表面负载EB155等阳性表位肽，通过FACs检测细胞表面表达的SLA‑2‑peptides‑β2m复合体，判定SLA‑2‑HB01‑pCDH/sT2具有递呈外源性多肽表位的功能。为了促进细胞表面复合体的形成，添加β2m有助于抗原多肽递呈效率的提高。本发明结果中，As63、EB155和Hu62肽类均能够被SLA‑2‑HB01‑‑pCDH/sT2细胞系递呈，其中As63在SLA‑2‑HB01‑pCDH/sT2、SLA‑2‑HB01‑Flag‑pCDH/sT2和SLA‑2‑HB01‑3×Flag‑pCDH/在sT2细胞系中均被递呈且递呈效率基本一致，说明本发明构建的系列表达SLA‑2‑HB01基因的sT2具有递呈抗原的功能，从而可以用以在细胞水平上筛选猪源病毒的多肽表位，也进一步证明了SLA‑2重链分子C‑末端添加Flag标签不会影响细胞系的抗原递呈功能。