[发明专利]一种表达热休克蛋白Hsp70的重组乳酸乳球菌及其制备方法和应用有效
申请号: | 202111521651.1 | 申请日: | 2021-12-13 |
公开(公告)号: | CN114015698B | 公开(公告)日: | 2023-08-22 |
发明(设计)人: | 黄克和;李好磊;岳冬梅;王孟孟;何文淼;刘丹丹;陈兴祥;甘芳;刘云欢 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N1/21;C12N15/74;A61K48/00;A61K38/17;A61P39/02;A61P39/06;C12R1/01;A61K35/744 |
代理公司: | 上海领誉知识产权代理有限公司 31383 | 代理人: | 温爱飞 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种表达热休克蛋白Hsp70的重组乳酸乳球菌及其制备方法和应用,通过PCR扩增Hsp70基因全序列并回收纯化,之后制备pNZ8149线性化载体,将两者进行同源重组连接反应,得到重组表达质粒pNZ8149‑Hsp70;制备感受态细胞,将重组表达质粒pNZ8149‑Hsp70通过电转化转入感受态细胞,制得高效表达Hsp70的重组乳酸乳球菌。本发明利用同源重组技术构建了重组Hsp70蛋白的乳酸菌表达体系,通过快速诱导可大量表达Hsp70,由于乳酸菌本身不含内毒素,因此无需进行蛋白纯化,可将诱导表达的蛋白连同菌液一同饲喂小鼠,然后再攻毒,经检测上述含Hsp70的菌液可减轻霉菌毒素对小鼠的伤害,对攻毒后的小鼠能起到很好的保护作用。 | ||
搜索关键词: | 一种 表达 休克 蛋白 hsp70 重组 乳酸 球菌 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
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