[发明专利]一种生产FecB基因g.A746G定点突变绵羊的试剂盒及其方法在审
| 申请号： | 202111586529.2 | 申请日： | 2021-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN114262708A | 公开（公告）日： | 2022-04-01 |
| 发明（设计）人： | 王小龙;周世卫;陈玉林;高亚伟;王倩;蔡蓓 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/10;C12N15/63;C12N15/66;C12N15/89;C12N15/113;C12N5/10;C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科领智诚知识产权代理事务所(普通合伙) 11782 | 代理人： | 陈士骞 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种生产FecB基因g.A746G定点突变绵羊的试剂盒及其方法。所述的试剂盒中含有FecB‑pegRNA的体外转录模板质粒、FecB‑sgRNA的体外转录模板质粒以及PE2mRNA的体外转录模板质粒，以FecB‑pegRNA的体外转录模板质粒、FecB‑sgRNA的体外转录模板质粒为模板经PCR扩增得到的FecB‑pegRNA体外转录模板序列如SEQ ID No.4所示，FecB‑sgRNA体外转录模板序列如SEQ ID No.5所示。将体外转录获得的pegRNA、sgRNA及PE2mRNA纯化后混合，注射入绵羊受精卵细胞质中，受精卵体外培养后移植入同种雌性绵羊输卵管中，生产的后代经检测后获得FecB基因g.A746G定点突变绵羊。本发明模拟自然界中存在的FecB基因g.A746G绵羊，同时与传统CRISPR/Cas技术相比极大地避免了随机突变、bystander突变、脱靶突变及基因组损伤，因此安全性更高。本发明为绵羊的精确基因编辑提供了重要技术支撑。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生产 fecb 基因 a746g 定点 突变 绵羊 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
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