[发明专利]一种牛源抑制金黄色葡萄球菌溶血功能的单链抗体及其制备方法和用途有效

专利信息
申请号: 202210094003.0 申请日: 2022-01-26
公开(公告)号: CN114409778B 公开(公告)日: 2023-04-11
发明(设计)人: 朱建国;程曼玲 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C07K16/12 分类号: C07K16/12;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/31;C12Q1/6883;C12N15/11;G01N33/68;A61K39/40;A61P31/04;A61P15/14;C12R1/19
代理公司: 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 代理人: 郑立
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种牛源抑制金黄色葡萄球菌溶血功能的单链抗体及其制备方法和用途,涉及基因工程领域,本发明采用RT‑PCR扩增牛源单链抗体编码基因的重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,利用SOE‑PCR法,将linker与VH基因和VL基因相连构建scFv基因,该scFv按照VL‑Linker‑VH的顺序进行连接,将其克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中构建单链抗体初级文库,辅助噬菌体M13KO7拯救初级文库,用原核表达的Hlb作为包被抗原,经过四轮的富集淘选后,采用phage ELISA方法筛选阳性克隆,获得的单链抗体能够特异性的结合金黄色葡萄球菌Hlb,表现出明显抑制金黄色葡萄球菌Hlb的溶血活性,从而减弱金黄色葡萄球菌对牛乳腺的致病性。
搜索关键词: 种牛 抑制 金黄色 葡萄球菌 溶血 功能 抗体 及其 制备 方法 用途
【主权项】:
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