[发明专利]一种适用于高通量靶向基因组甲基化检测的文库构建方法及其试剂盒在审
| 申请号： | 202210190373.4 | 申请日： | 2022-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN114774514A | 公开（公告）日： | 2022-07-22 |
| 发明（设计）人： | 娄加陶;王琳;郭志伟;余佳佳;杨国华 | 申请（专利权）人： | 上海羿鸣生物科技有限公司;羿鸣（苏州）诊断技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人： | 郎祺 |
| 地址： | 201318 上海市浦东新区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种适用于高通量靶向基因组甲基化检测的文库构建方法，步骤包括：将片段化DNA中非甲基化的C碱基转化为U碱基；通过若干线性扩增引物对包括靶向区域的步骤S1转化后的片段化DNA进行线性扩增；在步骤S2线性扩增后的产物中加入连接酶以及接头；对步骤S3连接后的产物进行PCR扩增，即得DNA测序文库分子；所述线性扩增所采用的酶组合物包括：至少一种具有3’‑5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶和/或至少一种不具有3’‑5’外切酶活性的DNA聚合酶。本发明的文库构建方法通过在高保真DNA聚合酶中添加其他类型的DNA聚合酶，以有效提高线形扩增效率，并提升文库转化效率，最终达到有效检测稀有的甲基化DNA分子(占比0.3％)。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 通量 靶向 基因组 甲基化 检测 文库 构建 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
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