[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法在审
申请号: | 202210264769.9 | 申请日: | 2022-03-17 |
公开(公告)号: | CN114807223A | 公开(公告)日: | 2022-07-29 |
发明(设计)人: | 张满义;梁军;冯泽泰;任新蓉;蒲小峰 | 申请(专利权)人: | 新疆方牧生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/50;C12N7/01;A61K39/215;A61P31/14 |
代理公司: | 北京高航知识产权代理有限公司 11530 | 代理人: | 乔浩刚 |
地址: | 844000 新疆维吾尔自治*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法,将猪流行性腹泻G2株在Vero‑CCL81细胞上传至P3代,随后对该分离株进行了鉴定,包括RT‑PCR检测、病毒含量检测、特异性试验。将分离G2型PEDV株进行基因组序列分析,找出G2型PEDV毒株S基因编码氨基酸序列中特有的氨基酸突变区域,利用成熟的基因克隆和载体构建技术,将PEDV感染性克隆受体结合域替换成AscI酶切位点,按照提取的pBAC‑PEDV(mut)质粒及pBAC‑PEDV阳性对照质粒转染Vero‑CCL81细胞进行病毒拯救,为该疫苗进入靶动物试验和临床试验阶段奠定了坚实的基础。 | ||
搜索关键词: | 种猪 流行性 腹泻 病毒 感染性 克隆 构建 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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