[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法在审

专利信息
申请号: 202210264769.9 申请日: 2022-03-17
公开(公告)号: CN114807223A 公开(公告)日: 2022-07-29
发明(设计)人: 张满义;梁军;冯泽泰;任新蓉;蒲小峰 申请(专利权)人: 新疆方牧生物科技有限公司
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/50;C12N7/01;A61K39/215;A61P31/14
代理公司: 北京高航知识产权代理有限公司 11530 代理人: 乔浩刚
地址: 844000 新疆维吾尔自治*** 国省代码: 新疆;65
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摘要: 发明公开了一种猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法,将猪流行性腹泻G2株在Vero‑CCL81细胞上传至P3代,随后对该分离株进行了鉴定,包括RT‑PCR检测、病毒含量检测、特异性试验。将分离G2型PEDV株进行基因组序列分析,找出G2型PEDV毒株S基因编码氨基酸序列中特有的氨基酸突变区域,利用成熟的基因克隆和载体构建技术,将PEDV感染性克隆受体结合域替换成AscI酶切位点,按照提取的pBAC‑PEDV(mut)质粒及pBAC‑PEDV阳性对照质粒转染Vero‑CCL81细胞进行病毒拯救,为该疫苗进入靶动物试验和临床试验阶段奠定了坚实的基础。
搜索关键词: 种猪 流行性 腹泻 病毒 感染性 克隆 构建 方法
【主权项】:
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