[发明专利]CamkB转基因致射血分数降低型心衰模型的搭建方法在审
申请号: | 202210298745.5 | 申请日: | 2022-03-23 |
公开(公告)号: | CN114634949A | 公开(公告)日: | 2022-06-17 |
发明(设计)人: | 刘静;林谦;徐江林;李岩;陈雅珺 | 申请(专利权)人: | 北京中医药大学东方医院 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/113;C12N15/55;C12N15/54;C12N15/90;C12N15/89;A01K67/027 |
代理公司: | 合肥铭辉知识产权代理事务所(普通合伙) 34212 | 代理人: | 张名列 |
地址: | 100078 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了CamkB转基因致射血分数降低型心衰模型的搭建方法,涉及生物技术领域,针对现有心衰模型的制备成本高,制备效果不理想等问题,现提出如下方案,运用Crisp‑cas9转基因技术,构建CaMKIIδB基因过表达小鼠,再通过他莫昔芬隔天注射,诱导CaMKIIδB基因过表达,1周后小鼠出现射血分数降低的心衰表型。本发明通过使用常规的CRISPR‑Cas9体外转录技术,实现降低容错率的效果同时,提升转录的效率,减低转录的成本,并且相较于常用的TA克隆、限制性酶切克隆及平滑末端克隆等方法存在连接效率低、需要特定限制性酶切位点以及耗时较长等缺点,本发明中采用的In‑Fusion Cloning方法能够将任意DNA片段克隆到任意线性化载体中,在进行PCR反应后,充分确保了目的基因的高保真性。 | ||
搜索关键词: | camkb 转基因 致射血 分数 降低 心衰 模型 搭建 方法 | ||
【主权项】:
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