[发明专利]油包菌数字PCR检测霍乱弧菌活的非可培养细胞的方法在审
申请号: | 202210336694.0 | 申请日: | 2022-04-01 |
公开(公告)号: | CN114480693A | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
发明(设计)人: | 赵硕;阚飙;卢昕;张京云 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/63 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及油包菌数字PCR检测霍乱弧菌活的非可培养细胞的方法。所述方法包括:针对经过PMA处理的待检测霍乱弧菌样本,采用PBS洗涤1~3次,采用热裂解释放DNA后进行PCR检测;根据检测结果判断VBNC状态霍乱弧菌的数量;所述热裂解法包括:在PCR循环开始的预变性步骤添加92~98℃,10~15分钟的处理步骤,以及4~37℃,10~15分钟的冷处理步骤。本发明通过油包菌数字PCR对霍乱弧菌的VBNC状态进行检测和绝对定量,可以准确、快速地检测出VBNC状态霍乱弧菌细胞的数量,这对于霍乱弧菌的VNBC细胞的检测有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 油包菌 数字 pcr 检测 霍乱弧菌 培养 细胞 方法 | ||
【主权项】:
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