[发明专利]一种ω-转氨酶突变体及其在制备西塞卡纳药物中间体的应用在审
申请号: | 202210371099.0 | 申请日: | 2022-04-08 |
公开(公告)号: | CN114645030A | 公开(公告)日: | 2022-06-21 |
发明(设计)人: | 黄俊;曹佳仁;邱帅;梅乐和;吕常江;樊芳芳;胡升;赵伟睿 | 申请(专利权)人: | 浙江科技学院 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 沈金龙 |
地址: | 310023 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在制备西塞卡纳药物中间体的应用,涉及分子生物学技术领域。一种ω‑转氨酶突变体,由来自土曲霉(Aspergillus terreus)的ω‑转氨酶突变所得,野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示,所述ω‑转氨酶突变体的突变位点为:V149A/R128L/L182V/D224K、V149A/R128L/L182F/D224K或V149A/L182F/L187F/D224K中的至少一种。本发明基于一种催化口袋疏水氨基酸的位阻效应,确定需要突变的氨基酸残基位点,结合高通量显色的定量筛选方法,通过定点突变技术进行实验验证,该方法可有效地提高突变氨基酸位点的筛选概率,提高实验效率及可行性,并筛选得到热力学稳定性、酶活性明显优于野生酶的突变酶。 | ||
搜索关键词: | 一种 转氨酶 突变体 及其 制备 西塞卡纳 药物 中间体 应用 | ||
【主权项】:
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