[发明专利]利用温敏型启动子高效表达乳铁蛋白的菌株及其构建方法与应用有效
申请号: | 202210492068.0 | 申请日: | 2022-05-05 |
公开(公告)号: | CN114672449B | 公开(公告)日: | 2023-09-05 |
发明(设计)人: | 吕雪芹;刘龙;陈坚;堵国成;李江华;刘延峰;崔世修 | 申请(专利权)人: | 江南大学;白马未来食品研究院 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/67;C12N15/12;C07K14/79;C12R1/19 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 王玉仙 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了利用温敏型启动子高效表达乳铁蛋白的菌株及其构建方法与应用,本发明通过融合PCR的方式构建启动子Ppr和乳铁蛋白的表达框,并利用P43启动子控制阻遏蛋白CI857的表达。进一步优化Ppr启动子上CI857结合位点的序列的间隔长度,通过发酵实验发现,不同长度的间隔序列导致不同的转录水平。其中三个结合位点之间的间隔序列分别为10bp时,与初始启动子相比,乳铁蛋白的转录水平提高了将近5倍,通过western blot发现乳铁蛋白的表达量增加了约3.2倍,达到了80mg/L。本发明能够有效的提高乳铁蛋白的表达量,并避免额外诱导剂的添加。 | ||
搜索关键词: | 利用 温敏型 启动子 高效 表达 铁蛋白 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
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