[发明专利]一种从头合成壳寡糖的多酶催化体系及其全细胞生产方法有效
| 申请号： | 202210557773.4 | 申请日： | 2022-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN114990174B | 公开（公告）日： | 2023-10-20 |
| 发明（设计）人： | 方真;丁春华;沙冲;章文劼 | 申请（专利权）人： | 江苏海飞生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P19/26;C12N15/70 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 赵巧娜 |
| 地址： | 212132 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从头合成壳寡糖的多酶催化体系及其全细胞生产方法，属于合成生物学领域和生物医药制备技术领域。本发明通过AmgK、GlmU、NodC、NodB的组合，构建了以乙酰氨基葡萄糖为底物单元从头合成壳寡糖的一种多酶催化体外途径；利用该酶组合与辅因子再生系统的偶联，底物磷酸化速率和聚合速率得到调控，壳寡糖聚合度可控(DP10)、分子量均一(～1000Da)。在此基础上以大肠杆菌为底盘菌，将所述酶组合中的基因整合到表达载体或基因组中进行过表达，同时过表达K‑12自身的GlmS、GlmM、GlmU，获得以单一底物(乙酰氨基葡萄糖或葡萄糖)为前体从头合成壳寡糖的全细胞，在5L发酵罐中壳聚糖产量可达23.2g/L，在1000L发酵罐体系中壳聚糖产量达到20g/L以上，展现了巨大的工业生产价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 从头 合成 寡糖 催化 体系 及其 细胞 生产 方法 | ||
【主权项】：
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