[发明专利]一种基于Tn558转座子构建的能表达荧光的自杀型质粒、构建方法及应用在审

专利信息
申请号: 202210921282.3 申请日: 2022-08-02
公开(公告)号: CN115572731A 公开(公告)日: 2023-01-06
发明(设计)人: 孙坚;龙腾飞;陈彩萍;黄紫蕾;何玉张;廖晓萍;刘雅红 申请(专利权)人: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
主分类号: C12N15/74 分类号: C12N15/74;C12N15/66;C12N15/65;C12N1/21;C12Q1/02;G01N21/76;C12R1/445
代理公司: 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 代理人: 成姗
地址: 510000 广东省广州市天河*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种基于Tn558转座子构建的能表达荧光的自杀型质粒、构建方法及应用。该自杀型质粒的构建方法包括:将Tn558和sfGFP进行重叠PCR得到Tn558::sfGFP片段,该片段与用BamHI单酶切后的线性化质粒pZ‑oriTRP4进行重组得到最终的自杀质粒pTn558‑GFP‑oriTRP4。将上述自杀质粒转化至大肠杆菌WM3064感受态细胞,得到大肠杆菌供体菌,可将其与金黄色葡萄球菌受体菌株共培养,构建金黄色葡萄球菌荧光菌株。本发明构建的基于金黄色葡萄球菌染色体radc基因定点荧光标记菌株方法效率较高,可用于构建耐药荧光菌株、药动药效学评价或筛选药物中。
搜索关键词: 一种 基于 tn558 座子 构建 表达 荧光 自杀 质粒 方法 应用
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