[发明专利]一种发酵生产羟基酪醇重组大肠杆菌的构建方法及应用在审
申请号: | 202210930591.7 | 申请日: | 2022-08-04 |
公开(公告)号: | CN116064344A | 公开(公告)日: | 2023-05-05 |
发明(设计)人: | 罗茂行;吴玉玲;王甜忆;董洪钢 | 申请(专利权)人: | 浙江熙正霖生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/55;C12N15/60;C12N15/61;C12N15/70;C12P7/22;C12R1/19 |
代理公司: | 无锡科嘉知信专利代理事务所(普通合伙) 32515 | 代理人: | 顾翰林 |
地址: | 311100 浙江省杭州市余*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种生物合成羟基酪醇的技术改进,具体为一种发酵生产羟基酪醇重组大肠杆菌的构建方法及应用,实现从简单碳源合成羟基酪醇的途径;将携带有质粒pRSFDuet‑HpaBC‑LAAD‑ARO10‑ADH和质粒pETDuet‑AROG‑TYRA的重组大肠杆菌BLAH和携带有质粒pRSFDuet‑1和pETDuet‑1的重组大肠杆菌BLCK于LB培养基中培养;按0.5~2%的接种量接入TB培养液中扩大培养,加入0.1~0.3mM的诱导剂进行诱导培养,以及在30℃,220r/min下继续培养进行产物的积累,每隔8小时液相色谱检测羟基酪醇产量。作为最简单的模式生物,其背景清晰,生长快速,易于规模化发酵培养且成本低廉;并且对大肠杆菌内源合成酪氨酸途径中的关键基因进行过表达,以及向积累酪氨酸的大肠杆菌宿主导入从酪氨酸合成羟基酪醇的异源基因,构建了从简单碳源合成羟基酪醇的途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 发酵 生产 羟基 重组 大肠杆菌 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
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