[发明专利]一种利用化学交联制备纯化泛素化或类泛素化组蛋白八聚体的方法有效
申请号: | 202211119498.4 | 申请日: | 2022-09-14 |
公开(公告)号: | CN115716878B | 公开(公告)日: | 2023-09-05 |
发明(设计)人: | 冯宇驰;李维捷;徐朋奇;张影;何俊 | 申请(专利权)人: | 深圳粒影生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C07K1/107;C07K1/22;C07K1/14 |
代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣国华;陈洁玲 |
地址: | 518107 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开一种利用化学交联制备纯化泛素化或类泛素化组蛋白八聚体的方法,包括以下步骤:(1)表达纯化得到突变型泛素或类泛素蛋白;所述突变型泛素的C末端为半胱氨酸,所述突变型类泛素蛋白的C末端甘氨酸对应的核苷酸序列突变为半胱氨酸对应的核苷酸序列;(2)表达纯化得到突变型的组蛋白八聚体;所述突变型的组蛋白八聚体在进行泛素化/类泛素化修饰位点上的赖氨酸突变为半胱氨酸;(3)利用化学交联剂,将突变型泛素或类泛素蛋白与突变型组蛋白八聚体在非变性条件下进行交联反应;(4)将化学交联反应产物进行标准色谱纯化。该方法利用化学交联方法直接在组蛋白八聚体水平上进行体外构建泛素化/类泛素化组蛋白八聚体。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 化学 交联 制备 纯化 泛素化 类泛素化 组蛋白 八聚体 方法 | ||
【主权项】:
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