[发明专利]一种绵羊DQB基因的1号外显子的扩增引物对、sg序列和应用在审

专利信息
申请号: 202211210723.5 申请日: 2022-09-30
公开(公告)号: CN116064506A 公开(公告)日: 2023-05-05
发明(设计)人: 许桥;陈燕;刘秋月;王海涛;马润林 申请(专利权)人: 中国科学院遗传与发育生物学研究所
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/12;C12N15/10;C12N15/113;C12N15/85;C12N15/64
代理公司: 北京高沃律师事务所 11569 代理人: 苏士莹
地址: 100020 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供了一种绵羊DQB基因的1号外显子的扩增引物对、sg序列和应用,涉及基因工程技术领域。本发明所述扩增引物对,可特异性扩增绵羊DQB基因的1号外显子区域,以扩增得到的该区域为靶基因,设计两对sg序列,通过引导CRISPR/Cas9发生基因编辑后可造成大片段缺失并导致移码突变,对DQB基因编码的蛋白质结构和功能造成较大破坏,有利于后续在体细胞或个体中进行DQB的基因编辑。在本发明实施例中,利用上述sg序列可以在湖羊胎儿成纤维细胞中实现编辑并获得基因编辑的单克隆细胞,筛选获得63个单克隆细胞株,测序后,基因编辑阳性率为66.7%,双等位基因均发生编辑的概率为28.6%。
搜索关键词: 一种 绵羊 dqb 基因 号外 扩增 引物 sg 序列 应用
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