[发明专利]一种高产β-榄香烯和germacrene A的重组菌的构建方法在审
| 申请号： | 202310178204.3 | 申请日： | 2023-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN116240229A | 公开（公告）日： | 2023-06-09 |
| 发明（设计）人： | 刘春立;埃里克·福德;薛凯;郝云鹏;白仲虎;杨艳坤;刘秀霞 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P5/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 刘峰 |
| 地址： | 214000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高产β‑榄香烯和germacreneA的重组菌的构建方法。首先，通过germacreneA合成酶的筛选和甲羟戊酸代谢途径的过表达实现β‑榄香烯和germacreneA的从头合成；然后，通过删除中心碳途径中的竞争途径确保了类异戊二烯途径中乙酰辅酶A、丙酮酸和甘油醛‑3‑磷酸的可用性；接着采用番茄红素颜色作为高通量筛选方法，通过易于出错的PCR诱变获得了优化的NSY305N。最后，在摇瓶中，通过关键途径酶、外排工程和翻译工程的最终构建的菌株β‑EL‑4产生了1161.09mg/L的β‑榄香烯和852.36mg/L的germacreneA，是目前报道的摇瓶水平的最高产量，在4‑L补料分批发酵中，β‑榄香烯和germacreneA的产量分别达到3.52g/L和2.13g/L。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高产 榄香烯 germacrene 重组 构建 方法 | ||
【主权项】：
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