[发明专利]一种金柑蔗糖生物合成关键酶基因FcSPP克隆和异源表达方法在审
申请号: | 202310220286.3 | 申请日: | 2023-03-09 |
公开(公告)号: | CN116355926A | 公开(公告)日: | 2023-06-30 |
发明(设计)人: | 龙凌云;黄秋岚;毛立彦;黄秋伟;李慧敏;檀小辉;刘功德;吴伦忠;苏艳兰;王丽萍;艾静汶;田程飘;黄惠芳 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区亚热带作物研究所(广西亚热带农产品加工研究所) |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N15/11;C12N9/16;C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 戴嵩玮 |
地址: | 530000 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明提供了一种金柑蔗糖生物合成关键酶SPP基因克隆和异源表达方法,涉及分子生物技术领域。本发明从脆蜜金柑转录组测序数据筛选的Unigene设计CDS序列扩增引物,以RNA反转录的cDNA为模板,经PCR扩增、产物回收、测序分析获得FcSPP基因的CDS序列。根据所述CDS序列设计RACE扩增引物,经过RACE扩增得到5’末端和3’末端cDNA序列,而后将上述各片段拼接获得cDNA全长序列。本发明还利用原核表达的方式诱导表达并获得FcSPP基因CDS编码的纯化蛋白;利用获得FcSPP基因全长cDNA序列设计可用于检测该基因在果实发育不同时期表达量情况的实时定量PCR引物。 | ||
搜索关键词: | 一种 蔗糖 生物 合成 关键 基因 fcspp 克隆 表达 方法 | ||
【主权项】:
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