[发明专利]一种自分泌IL-21的NKL-IL21细胞系及其构建方法和应用在审
申请号: | 202310421034.7 | 申请日: | 2023-04-14 |
公开(公告)号: | CN116590343A | 公开(公告)日: | 2023-08-15 |
发明(设计)人: | 张建;张海荣;韩秋菊;赵华俊 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/24;C12N5/10;A61K35/17;A61K38/20;A61P35/00 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 王志坤 |
地址: | 250012 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种自分泌IL‑21的NKL‑IL21细胞系及其构建方法和应用。自分泌IL‑21的NKL‑IL21细胞系的构建方法,包括以下步骤:S1、使用内切酶酶切核酸序列如SEQ ID NO.1所示的hIL‑21基因片段和慢病毒载体,通过连接酶将酶切后的hIL‑21基因和慢病毒载体连接,获得目的质粒;S2、使用磷酸钙转染法将目的质粒与包装质粒转染至细胞中,培养后收取病毒液并浓缩纯化;S3、使用浓缩纯化后的病毒液感染NKL细胞,将感染的NKL细胞进行扩增,得到NKL‑IL21细胞系。为解决外源性添加IL‑21的缺陷,本发明构建了人IL‑21(hIL‑21)基因修饰的NKL细胞系NKL‑IL21,以探究修饰之后自分泌的IL‑21对NKL细胞的作用以及作用机制,建立一种抗肿瘤作用更强的NK细胞系,并为克服肿瘤微环境、提高过继转输NK细胞的疗效提供新的思路。 | ||
搜索关键词: | 一种 分泌 il 21 nkl il21 细胞系 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
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