[发明专利]泯活素的制备方法及其应用

摘要

本发明是关于制备泯活素(Minactivin)的方法，泯活素是尿激酶型血纤维蛋白溶酶原活化剂的天然蛋白质钝化剂，这种血纤维蛋白溶酶原活化剂与侵入性肿瘤有关。因此，泯活素是身体内防御肿瘤的入侵和转移的关键因素。将能产生泯活素的细胞在体外培养，然后回收细胞培养的上清液，便可制备出泯活素。经控制培养条件，便可生产出部分纯化的蛋白质泯活素，该泯活素可用于诊断和治疗肿瘤。

主权项

1.一种制备蛋白质泯活素的方法，其中制得的泯活素的特征为：a)在血纤维蛋白存在下，能够特别抑制人尿激酶型血纤维蛋白溶酶原活化剂，但不能抑制组织型血纤维蛋白溶酶原活化剂；b)在56℃以上温度下是热不稳定的；c)冷冻至-20℃及解冻时是稳定的；d)在4℃，在pH5-9范围内是稳定的；e)pI值在5.0-7.8之间；f)能与人尿激酶或人尿激酶型血纤维蛋白溶酶原活化剂形成一种抗去污剂复合物，g)在未还原的SDS-PAGE上产生至少一个Mr为35.5±3.5KD、43.5±4.5KD或55.5±6KD的染色带，当该蛋白质与尿激酶一起培养时，该染色带消失，该方法包括：在体外培养能产生泯活素的细胞，这些能产生泯活素的细胞来自人类血液单核细胞、能产生泯活素的巨噬细胞和单核细胞源的转化细胞的单层培养物；从培养的上层清液中用苯基琼脂糖层析紧接着用Cibacron蓝色琼脂糖层析或制备非变性凝胶电泳回收泯活素，制得基本上纯的泯活素。