[发明专利]制备能产生用于回收人外周血中白细胞的单克隆抗体的杂交瘤细胞系的方法和利用所述单克隆抗体的回收方法

摘要

一种鼠的单克隆抗体，它与暴露在红细胞膜上的血型糖蛋白A的决定簇位点或特异抗原决定簇选样性地结合而不与其它血型糖蛋白结合。将这种单克隆抗体包被在一个微球体或一个合适的单分散种类的基质上并在无红细胞溶解时回收白细胞亚型的分离程序中利用这种单克隆抗体。在样品的白血细胞群体不相反减少时回收被结合的微球体。所用的微球体或珠粒与细胞之比使本发明非常适用于商业。因此本发明使得不需红细胞溶解就能精确检测循环外周血中的白细胞亚型。

主权项

1.一种生产小鼠单克隆抗体的方法，其特征在于所述的单克隆抗体只与暴露于人红细胞膜表面上的血型糖蛋白A的特异性抗原决定簇(称为KC-16抗原决定簇)结合，而不与血型糖蛋白B结合，所述单克隆抗体用于从人血样中回收白血细胞而不使红细胞溶解，所述单克隆抗体进一步的特征在于它缺乏与白细胞或血小板的结合特异性，红细胞具有O，A，B和AB型，Rh阳性和Rh阴性两种，单克隆抗体不改变样品中白血细胞的形态学，该方法包括：(1)给Balb/c小鼠接种得自人实体瘤的肺腺瘤细胞并从接种小鼠中收集产生的脾细胞，(2)使小鼠浆细胞瘤细胞系SP2/0-Ag14与所收集的脾细胞融合生成杂交瘤细胞，(3)分离通过在选择性培养基上培养而产生的杂交瘤细胞以除去所收集的其它细胞，(4)筛选所分离的杂交瘤细胞以鉴定并收集可产生与所述KC-16抗原决定簇特异性结合的单克隆抗体的杂交瘤细胞系，该细胞系具有1986年8月20日储存于中国典型培养物保藏中心，保藏号为G-86003的样品的特征，(5)在适当的培养基中培养所收集的杂交瘤细胞以产生对KC-16抗原决定簇特异的单克隆抗体。