[发明专利]编码脱乙酸基头孢菌素C合成酶和脱乙酰头孢菌素C合成酶的重组DNA表达载体及DNA化合物

摘要

本发明涉及编码脱乙酸基头孢菌素C合成酶(DAOCS)和脱乙酰头孢菌素C合成酶(DACS)活性的DNA化合物和表达载体。该化合物可用来构建用于多种宿主细胞包括大肠杆菌、青霉和头孢霉的重组DNA表达载体。本发明也涉及顶头孢霉DACS/DAOCS基因的调控成分。还提供了选择青霉转化体的方法，包括那些因DACS/DAOCS编码DNA的存在而能够合成头孢菌素抗生素的转化体。本转化系统利用乙酰胺酶基因来选择转化体。

主权项

1.一种在从大肠杆菌、头孢霉菌和青霉菌组成的一组中选出的重组宿主细胞中表达脱乙酰基头孢霉素C合成酶(简称：DACS)/脱乙酸基头孢霉素C合成酶(简称：DAOCS)活性的方法，该方法包括：(1)用一个重组体DNA表达载体转化该宿主细胞，其中包括：(a)一个在宿主细胞中起作用的启动子和翻译的活化顺序；和(b)一个编码DACS/DAOCS活性的并处于由启动子表达的位置的如下DNA顺序：5′-ATGACTTCCAAGGTCCCCGTCTTTCGTCTCGACGACCTCAAGAGCGGCAAGGTCCTCACCGAGCTCGCCGAGGCCGTCACCACCAAGGGTATCTTCTACTTGACCGAGAGCGGCCTGGTCGACGACGACCACACCTCGGCGCGTGAGACGTGCGTTGACTTTTTCAAGAACGGAAGCGAGGAGGAGAAGAGGGCCGTGACGCTCGCCGACCGTAACGCCCGCCGCGGCTTCTCTGCCCTCGAGTGGGAGAGCACCGCCGTCGTCACCGAGACGGGCAAGTACTCGGACTACTCGACGTGCTACTCCATGGGCATCGGCGGCAACCTGTTCCCGAACCGGGGCTTCGAGGACGTCTGGCAGGACTACTTCGACCGCATGTACGGCGCAGCCAAGGATGTCGCGCGCGCCGTTCTCAACTCTGTGGGCGCCCCGCTCGCCGGGGAGGACATTGATGACTTCGTCGAGTGCGATCCCCTCCTCCGCCTACGGTACTTCCCCGAAGTGCCGGAGGACCGCGTCGCCGAAGAGGAACCCCTCCGCATGGGACCCCACTACGACCTATCGACCATCACGCTCGTGCACCAGACAGCCTGCGCCAACGGCTTCGTGAGCCTGCAGTGCGAGGTGGACGGAGAATTCGTCGACCTCCCGACGCTCCCCGGCGCCATGGTCGTCTTCTGCGGCGCGGTCGGCACCCTGGCCACGGGCGGCAAGGTCAAGGCGCCCAAGCACCGGGTCAAGTCTCCCGGGCGCGACCAGCGCGTCGGCAGCAGCCGCACGTCGAGCGTCTTCTTCCTGCGGCCGAAGCCCGACTTCAGCTTCAACGTGCAGCAGTCGAGGGAGTGGGGTTTCAACGTCCGCATCCCGTCGGAGCGCACGACGTTCAGGGAGTGGCTTGGCGGGAACTATGTCAACATGCGGAGGGATAAGCCGGCGGCAGCGGAGGCGGCTGTCCCCGCGGCTGCCCCTGTCTCTACCGCAGCTCCTATAGCCACT-3′