[发明专利]产生具有第八因子活性的第八因子缺失突变体的方法无效
| 申请号： | 88103482.7 | 申请日： | 1988-06-11 |
| 公开（公告）号： | CN1033760C | 公开（公告）日： | 1997-01-08 |
| 发明（设计）人： | 瓦·奥耶·阿尔伯特·约翰森·约瑟夫;帕尼科克·汉森;弗比特·马蒂尼·菲利浦斯;瓦利·罗伯特·威廉姆 | 申请（专利权）人： | 伊姆诺股份公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;A61K38/00 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人： | 辛敏忠 |
| 地址： | 奥地利*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明提供通过908-949氨基酸缺失制备突变第VIII因子cDNA的方法。cDNA在转化的COS细胞中表达，得到在赖-338到谷酰-1638间氨基酸有相应缺失的第VIII因子蛋白。所得蛋白似乎能纠正血友病A病人的凝血缺陷，该蛋白具有完整的链，表现出相对高的表达水平。 | ||
| 搜索关键词： | 产生 具有 第八 因子 活性 缺失 突变体 方法 | ||
【主权项】：
1.产生有第VIII因子活性的第VIII因子缺失突变体的方法，该方法包括在一营养培养基中培养含有表达载体的哺乳动物宿主细胞，所述表达载体在其转录方向上包含：A)一转录调节区，B)在哺乳动物宿主细胞中具有功能的翻译起始区，C)编码一蛋白质的DNA序列，该蛋白质具有第VIII因子的生物活性且除以下缺失外具有对应于第VIII因子的氨基酸序列，i)Ser-741至Ser1637和Gln-1638至Ile-1668的氨基酸序列(缺失741—1668，△928；或ii)Ser-741至Ser1637和Lys-713至Arg-740的氨基酸序列(缺失713—1637，△925；或iii)Ser-741至Ser1637和Lys-713至Arg-740的氨基酸，并在缺失位点插入氨基酸序列Pro-Arg-Val-Ala(缺失713—1637，插入PRVA，△925；或iv)Ser-741至Ser1637和Ser-1637的氨基酸序列和Gln-1638至Ile-1668的部分氨基酸序列，所述部分为Gln-1638至Arg-1648(缺失741—1648，△908；或v)Ser-741至Ger-1637、Lys-713至Arg-740和Gln-1638至Ile-1668的氨基酸序列(缺失713—1668，△956，)或vi)Ser-741至Ser-1637、Lys-713至Arg-740和Gln-1638至Ile-1668的氨基酸序列，在缺失位点插入氨基酸序列Pro-Arg-Vla-Ala(缺失713—1668，插入PRVA，△956)，D)在所述宿主细胞中具有功能的翻译和转录终止区，其中所述DNA序列的表达是由所述起始和终止区调节的，以及分离所述蛋白质。
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