[发明专利]大鼠促黄体生成素和催乳素的四氯二苯脲标记法无效
申请号: | 91100787.3 | 申请日: | 1991-02-09 |
公开(公告)号: | CN1034243C | 公开(公告)日: | 1997-03-12 |
发明(设计)人: | 毛培忠;李爱英;胡自正;王燕复 | 申请(专利权)人: | 天津市计划生育研究所 |
主分类号: | G01N33/534 | 分类号: | G01N33/534 |
代理公司: | 天津三元专利事务所 | 代理人: | 郑永康 |
地址: | 300191*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 一种测定大鼠rLH和rPRL的Iodogen标记法,将Iodogen溶于CH2Cl2中,置于反应管内室温下干燥,标记用rLH或rPRL溶液及PBS,分别置于该反应管中,加入NaI溶液,连续搅拌,再加入PBS静置,以葡聚糖分离纯化,并用PBS平衡并洗脱柱子,用自动收集器收集30-40管洗脱液,最后依次测定各管放射性。本法标记率为80%,放射化学纯度在90%以上,免疫活性稳定,重复性好。 | ||
搜索关键词: | 大鼠 黄体 生成 催乳素 四氯二苯脲 标记 | ||
【主权项】:
1、一种大鼠促黄体生成素和催乳素的四氯二苯脲标记法,其特征在于先将氧化剂四氯二苯脲溶于二氯甲烷中,浓度为0.4-0.6毫克/毫升,取其中40-60微升置于具盖反应管中,在15-20℃室温下干燥使溶剂挥发干,标记用促黄体生成素或催乳素10-20微克溶液8-12微升及0.5M、PH7.2-7.6的磷酸盐缓冲溶液90-110微升,分别置于上述的具盖反应管中,然后加入0.5-0.6毫居里的碘化钠溶液,连续搅拌7-10分钟,最后加入150-250微升、0.05M、PH7.2-7.6的磷酸盐缓冲溶液,静置4-6分钟后上柱,以30×1.0厘米葡聚糖G100层析柱分离纯化,0.05M、PH7.2-7.6磷酸盐缓冲溶液平衡并洗脱柱子,用自动收集器收集洗脱液,流速1毫升/2分钟/管,共收集30-40管,然后依次测定各管的放射性,标记激素以0.1M、PH7.2-7.6含有0.4-0.6克/100毫升溶液的牛血清白蛋白和0,1-0.3克/100毫升溶液的迭氮钠的磷酸盐缓冲溶液稀释一倍,在2℃-5℃温度下存放。
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