[发明专利]生产腈水化酶的方法无效
| 申请号： | 91101323.7 | 申请日： | 1991-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN1054639C | 公开（公告）日： | 2000-07-19 |
| 发明（设计）人： | 别府辉彦;山田秀明;长泽透;堀之内末治;西山真 | 申请（专利权）人： | 三菱人造丝株式会社;别府辉彦;山田秀明 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N9/00;C12P21/02;C12P19/34;C12P13/02 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 汪洋 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明公开了由玫瑰色红球菌Ｊ－１产生的两种腈水化酶的α－和β－亚单位的氨基酸顺序和核苷酸顺序。将编码腈水化酶的ＤＮＡ片段插入表达载体并将该重组载体用于转化。转化株与常规用的微生物相比含有基因的更多拷贝和能生产更大量的腈水化酶。 | ||
| 搜索关键词： | 生产 水化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种生产腈水化酶的方法，该方法包括培养用重组DNA转化的转化株，并从培养物中回收腈水化酶，所述重组DNA包括位于载体中的编码具有腈水化酶活性的多肽的DNA(H)或DNA(L)片段，所述多肽含有下列α(H)亚单位和β(H)亚单位，或α(L)亚单位和β(L)亚单位：α(H)亚单位：51015MetSerGluHisValAsnLysTyrThrGluTyrGluAlaArgThr202530LysAlaIleGluThrLeuLeuTyrGluArgGlyLeuIleThrPro354045AlaAlaValAspArgValValSerTyrTyrGluAsnGluIleGly505560ProMetGlyGlyAlaLysValValAlaLysSerTrpValAspPro657075GluTyrArgLysTrpLeuGluGluAspAlaThrAlaAlaMetAla808590SerLeuGlyTyrAlaGlyGluGlnAlaHisGlnIleSerAlaVal95100105PheAsnAspSerGlnThrHisHisValValValCysThrLeuCys110115120SerCysTyrProTrpProValLeuGlyLeuProProAlaTrpTyr125130135LysSerMetGluTyrArgSerArgValValAlaAspProArgGly140145150ValLeuLysArgAspPheGlyPheAspIleProAspGluValGlu155160165ValArgValTrpAspSerSerSerGluIleArgTyrIleValIle170175180ProGluArgProAlaGlyThrAspGlyTrpSerGluGluGluLeu185190195ThrLysLeuValSerArgAspSerMetIleGlyValSerAsnAla200LeuThrProGlnGluValIleValβ(H)亚单位：51015MetAspGlyIleHisAspThrGlyGlyMetThrGlyTyrGlyPro202530ValProTyrGlnLysAspGluProPhePheHisTyrGluTrpGlu354045GlyArgThrLeuSerIleLeuThrTrpMetHisLeuLysGlyIle505560SerTrpTrpAspLysSerArgPhePheArgGluSerMetGlyAsn657075GluAsnTyrValAsnGluIleArgAsnSerTyrTyrThrHisTrp808590LeuSerAlaAlaGluArgIleLeuValAlaAspLysIleIleThr95100105GluGluGluArgLysHisArgValGlnGluIleLeuGluGlyArg110115120TyrThrAspArgLysProSerArgLysPheAspProAlaGlnIle125130135GluLysAlaIleGluArgLeuHisGluProHisSerLeuAlaLeu140145150ProGlyAlaGluProSerPheSerLeuGlyAspLysIleLysVal155160165LysSerMetAsnProLeuGlyHisThrArgCysProLysTyrVal170175180ArgAsnLysIleGlyGluIleValAlaTyrHisGlyCysGlnIle185190195TyrProGluSerSerSerAlaGlyLeuGlyAspAspProArgPro200205210LeuTyrThrValAlaPheSerAlaGlnGluLeuTrpGlyAspAsp215220225GlyAsnGlyLysAspValValCysValAspLeuTrpGluProTyrLeuIleSerAlaα(L)亚单位：51015MetThrAlaHisAsnProValGlnGlyThrLeuProArgSerAsn202530GluGluIleAlaAlaArgValLysAlaMetGluAlaIleLeuVal354045AspLysGlyLeuIleSerThrAspAlaIleAspHisMetSerSer505560ValTyrGluAsnGluValGlyProGlnLeuGlyAlaLysIleVal657075AlaArgAlaTrpValAspProGluPheLysGlnArgLeuLeuThr808590AspAlaThrSerAlaCysArgGluMetGlyValGlyGlyMetGln95100105GlyGluGluMetValValLeuGluAsnThrGlyThrValHisAsn110115120MetValValCysThrLeuCysSerCysTyrProTrpProValLeu125130135GlyLeuProProAsnTrpTyrLysTyrProAlaTyrArgAlaArg140145150AlaValArgAspProArgGlyValLeuAlaGluPheGlyTyrThr155160165ProAspProAspValGluIleArgIleTrpAspSerSerAlaGlu170175180LeuArgTyrTrpValLeuProGlnArgProAlaGlyThrGluAsn185190195PheThrGluGluGlnLeuAlaAspLeuValThrArgAspSerLeu200205IleGlyValSerValProThrThrProSerLysAlaβ(L)亚单位：51015MetAspGlyIleHisAspLeuGlyGlyArgAlaGlyLeuGlyPro202530IleLysProGluSerAspGluProValPheHisSerAspTrpGlu354045ArgSerValLeuThrMetPheProAlaMetAlaLeuAlaGlyAla505560PheAsnLeuAspGlnPheArgGlyAlaMetGluGlnIleProPro657075HisAspTyrLeuThrSerGlnTyrTyrGluHisTrpMetHisAla808590MetIleHisHisGlyIleGluAlaGlyIlePheAspSerAspGlu95100105LeuAspArgArgThrGlnTyrTyrMetAspHisProAspAspThr110115120ThrProThrArgGlnAspProGlnLeuValGluThrIleSerGln125130135LeuIleThrHisGlyAlaAspTyrArgArgProThrAspThrGlu140145150AlaAlaPheAlaValGlyAspLysValIleValArgSerAspAla155160165SerProAsnThrHisThrArgArgAlaGlyTyrValArgGlyArg170175180ValGlyGluValValAlaThrHisGlyAlaTyrValPheProAsp185190195ThrAsnAlaLeuGlyAlaGlyGluSerProGluHisLeuTyrThr200205210ValArgPheSerAlaThrGluLeuTrpGlyGluProAlaAlaPro215220225AsnValValAsnHisIleAspValPheGluProTyrLeuLeuProAla
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