[发明专利]尖吻蝮蛇毒去纤酶纯化方法

摘要

尖吻蝮蛇毒去纤酶的纯化方法，它包括蛇毒溶解、柱层析洗脱粗分得凝血酶样酶组分，又经柱层析洗脱纯化得精制凝血酶样酶原液，再经脱盐得去纤酶原液，直至制得注射用去纤酶成品等工艺。本纯化方法简便，易于掌握，产率高，药源丰富，价格便宜。由本法所制的去纤酶同时具有去纤及溶纤的作用，是治疗血管闭塞性疾病一种新的酶制剂。经临床验证表明它具有疗效高，疗程短，使用方便、较为安全的特点。

主权项

1、尖吻蝮蛇毒去纤酶的纯化方法，它包括：(1)蛇毒用缓冲液溶解，离心沉淀经阴离子交换剂柱层析，用缓冲液洗脱粗分得凝血酶样酶组分；(2)将所得凝血酶样酶组分又分别经阴离子交换剂柱层析，纯化得精制的凝血酶样酶；(3)将精制凝血酶样酶原液再经脱盐得去纤酶原液；(4)将所得去纤酶原液配方，过滤、分装、冷冻、干燥、熔封、即得注射用去纤酶成品；其特征在于：a、蛇毒用PH7.8-8.6的缓冲液溶解，经阴离子交换剂柱层析，用PH7.8-8.6缓冲液氯化钠直线梯度洗脱粗分得凝血酶样酶组分；b、将所得凝血酶样酶组分按顺序或分两组经阴离子交换剂两次以上柱层析，用PH7.8-8.6缓冲液氯化钠直线梯度两次以上洗脱纯化得精制凝血酶样酶原液；c、粗分所得凝血酶样酶组分及再纯化中所得凝血酶样酶原液可直接上样，全工序操作在10℃～20℃半无菌或无菌室中进行。