[发明专利]分离表型相关基因的方法及其装置

摘要

本发明涉及一种直接准确分离有确定表型的复杂基因组ＤＮＡ中任何部位任何类型的该表型相关基因的方法及其装置。其包括通过样本和对照本基因组ＤＮＡ的二次酶切和混合双向电泳把杂交双方复杂度降至十万分之一，然后通过原位减法杂交分离重排型或去甲基化型突变片段，通过原位加法杂交分离点突变片段。本发明适用于人类任何生理或病理表型相关基因，特别是大多数常见致命疾病相关基因和多种经济作物高产、优质、抗病、抗逆表型相关基因的分离。

主权项

1、一种分离表型相关基因的方法；其特征在于包括下列步骤：第一步，把有目标表型的样本和无目标表型的对照本DNA限制片段混合双向电泳，分散到凝胶上，从而减少同一位点重叠在一起的DNA限制片段种数；第二步，通过碱液变性--中性液复性处理上述凝胶片，使其中含有的DNA片段在电泳原位相互杂交；第三步，将不杂交的重排型突变片段和去甲基化/甲基化突变片段及杂交形成错配处的点突变片段分离到另一胶膜上；第四步，通过对第三步分离出来的突变片段，即等基因系的表型相关基因片段加双接头和相应引物原位PCR，或放射自显影后在试管中PCR扩增其为探针；在上述四步中，通过把样本和对照本片段混合电泳以使同源片段间同位而充分杂交，通过双向凝胶过滤电泳以使非同源片段间错位而不杂交。