[发明专利]制备异多聚体多肽的方法

摘要

本发明涉及一种制备异多聚体多肽如双特异性抗体、双特异性免疫粘附素和抗体—免疫粘附素嵌合体的方法。本发明还涉及用该方法制得的异多聚体。一般而言,该方法涉及在第一多肽界面上引入突起和在第二多肽界面上引入相应的空穴,从而使该突起可置于空穴中,以便促进异多聚体的形成并抑制同多聚体的形成。“突起”的构建是用侧链更大的氨基酸(如酪氨酸或色氨酸)替换第一多肽界面上小侧链的氨基酸。大小相同或相似的、作为突起的补偿性“空穴”是用侧链更小的氨基酸(如丙氨酸或苏氨酸)替换第二多肽界面上大侧链的氨基酸而形成的。突起和空穴可用人工合成方法形成,如改变编码多肽的核酸或通过肽合成。

主权项

1.一种制备异多聚体的方法，其特征在于，该异多聚体包括在界面处相接触的第一多肽和第二多肽，其中第一多肽的界面上含有突起，该突起可置于第二多肽界面上的空穴中，该方法包括：(a)培养含有编码第一多肽和第二多肽的核酸的宿主细胞，其中编码第一多肽的核酸已从最初的核酸被改变从而编码突起，或者编码第二多肽的核酸已从最初的核酸被改变从而编码空穴，或两者都改变，而且该培养使核酸被表达；(b)从宿主细胞培养物中回收异多聚体。